鉴定蛋白
鉴定蛋白是指通过一系列实验方法识别和确定样品中存在的蛋白质的种类、数量、功能以及修饰等信息。蛋白质是细胞内外各种生物学活动的执行者,几乎所有的细胞功能都离不开蛋白质的参与。因此,准确地鉴定蛋白,尤其是在复杂的生物样本中,能够为我们提供丰富的信息,帮助科学家从分子层面理解生命活动的基本规律。准确的蛋白
圆二色性光谱有哪些优势和局限?
圆二色性光谱(Circular Dichroism, CD)作为研究生物大分子构象的光谱技术,因其操作简便、数据直观,在结构生物学和生物物理学领域中被广泛应用。尤其是在蛋白质、核酸等手性分子的二级结构分析、构象变化监测以及分子间相互作用研究中,CD光谱是一种不可替代的技术手段。然而,正如所有实验技术
从血浆到组织:多种样本类型的DIA-MS分析解决方案
在蛋白质组学研究中,样本类型的复杂性和实验数据的可重复性往往难以兼顾。如何在血浆、组织、细胞和体液等多种生物样本中实现高通量、低偏倚的定量分析,是当前质谱技术持续优化的核心命题。数据独立采集质谱(Data-Independent Acquisition, DIA-MS)以其高覆盖率、良好重复性和缺失
如何评估定制合成肽的质量?
在进行抗体制备、蛋白互作研究、质谱分析或疫苗开发等实验时,定制合成肽(custom peptide synthesis)的质量直接关系到实验的可靠性和可重复性。随着多肽在功能研究、分子靶向和创新药物研发中的广泛应用,科研人员越来越关注合成肽的纯度、准确性与稳定性等核心参数。尤其在高通量筛选、靶点验证
膜蛋白组学如何加速药物靶点筛选?
膜蛋白(Membrane proteins)在细胞生理和信号转导中发挥关键作用,是当前药物研发中最重要的靶点类别之一。据统计,超过 60% 的FDA批准药物作用于膜蛋白,尤其是 G 蛋白偶联受体(GPCRs)、离子通道和转运体。然而,由于膜蛋白的疏水性、低丰度和结构复杂性,其系统性的研究长期面临技术
利用MALDI-TOF质谱技术进行蛋白质N-端序列分析
蛋白质的N-端序列分析是解析蛋白质功能、翻译后修饰及生物合成机制的重要手段。传统的Edman降解法是经典的N-端测序技术,但其在复杂样本中的应用受限。近年来,基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)以其高灵敏度、快速检测能力和宽动态范围,在蛋白质N-端序列分析方面展现出重要应用
如何利用LC-MS/MS提高C端测序的灵敏度和准确性?
在基于LC-MS/MS的C端测序中,灵敏度和准确性的提升需通过样品处理、仪器参数优化及数据分析策略的系统性协同改进。以下是关键优化方向: 1、选择合适的蛋白酶及样品制备策略 C端测序的关键在于获得高效、特异的C端肽段。常规酶(如胰蛋白酶)主要针对特定氨基酸切割,而非特异性酶(如蛋白酶K)或特定C端
如何通过蛋白全长测序验证复杂异构体的存在?5步操作指南
在蛋白表达系统中,即使来源于同一基因,所产生的蛋白质也可能因剪接变异、翻译起始差异、翻译后修饰或降解途径不同,形成多个结构相似但功能各异的蛋白质异构体(protein isoforms)。这些异构体广泛存在于天然蛋白中,尤其在抗体药物、融合蛋白及重组酶等生物制品开发过程中,其微小的结构差异可能对蛋白
为什么Edman降解仍然重要?探索其不可替代的应用场景
在质谱技术主导蛋白质组学的时代,Edman降解似乎成了“过去式”。但事实并非如此。作为一种经典且精准的N端蛋白质测序方法,Edman降解在多个关键场景中依然有着不可替代的价值,尤其是在蛋白质结构验证、药物质量控制以及非模式生物的研究中。本文将深入解析Edman降解的原理与优势
De Novo测序和同源性搜索,如何协同分析?
在蛋白组学研究中,数据库搜索(Database Search)仍是主流分析方式,但它高度依赖现有数据库的完整性与准确性。当我们面对的是非模式生物、天然产物、抗体片段或翻译起始位点变异的肽段时,数据库可能无法匹配这些“新序列”,导致错配或完全漏报。 这时,De Novo测序(
